unbenutztes Filtrationsgerät Merck iso-grid 4009 (Nutsche)

Artikel: Filtrationsapparatur zur Vakuumfiltration z.B. bei der Trinkwasseruntersuchung (
Methode: hydrophobic grid membrane Filtration
Hersteller/Typ: Merck iso-grid 4009
Zustand: unbenutzt in OVP, jedoch lange gelagert wodurch lagerungsspuren auftreten können
Lieferumfang: wie abgebildet
Weiteres: Es handelt sich um einen Filterhalter. Im Runden Rohr oben werden Probe und ggls. Löse- oder Suspensionsmittel aufgegeben und passieren einen Metall-Vorfilter. Auf das darunterliegende, Quadratische Stützgewebe wird eine ISO_GRID-Membrane aufgelegt. Dort werden die Zielorganismen aufgefangen und die Membran im Anschluss auf oder im Nährmedium bebrütet.
Hier noch eine etwas holprige Übersetzung der Methode:
Hydrophober Gittermembranfilter (HGMF)
Der hydrophobe Gittermembranfilter ist ein neuer Ansatz zur mikrobiologischen Zählung. Er besteht aus einem mikroporösen Membranfilter mit einer Porengröße von 0,45µm, auf dem ein Gittermuster aufgebracht wurde.
a. Ein Membranfilter wird auf die Oberfläche eines Agarmediums platziert, Wasser mit gelösten Nährstoffe aus dem Medium durch Kapillarwirkung durch die Poren des Filters nach oben befördert und die Mikroorganismen zu ernähren, die während der Filtration auf
der oberen Oberfläche während der Filtration zurückgehalten werden.
b. Dadurch entsteht ein mikroskopischer Feuchtigkeitsfilm auf der oberen Oberfläche des Membranfilters, durch den durch den die beweglichen Organismen wandern können.
c. Das hydrophobe Gittermuster eines HGMF unterbricht diesen Feuchtigkeitsfilm und hindert die beweglichen Organismen daran, sich über die Grenzen der Gitterquadrate, in denen sie gelandet sind zu bewegen.
d. Außerdem werden überall dort, wo das hydrophobe Material auf dem Filter abgelagert wurde, sind die Poren blockiert und das Wasser wird daran gehindert Nährstoffe zu verirrten Mikroorganismen zu bringen, die auf eine Gitterlinie geschoben werden könnten, wenn die Kolonie sich vergrößert und den Platz ausfüllt.
e. Der Analytiker kann dann die Quadrate als einzelne Kolonien. Automatische Instrumente sind ebenfalls verfügbar, um diese quadratischen Kolonien in Sekunden zu zählen.
Diese Methode wurde für die Prüfung einer Vielzahl von Lebensmitteln in den letzten Jahrzehnten eingesetzt. Diese Methode ist auch von der AOAC als offizielle Methode anerkannt. Die ISO-GRID/NEOGRID (Neogen, Lansing, MI) Tests basieren auf dem
Konzept der hydrophoben Gittermembranfiltration.
a. Die Filtermembran wird mit hydrophober Farbe geprägt, um ein Gitter zu erzeugen, das 1600 einzelne Quadrate enthält.
b. Die hydrophobe Beschaffenheit der Farbe enthält das Wachstum eines Organismus, der während des Filtrationsprozesses isolierten Organismus innerhalb des Quadrats der Aufnahme.
c. Die Proben werden zunächst in einem sterilen Puffer verdünnt. Die ISO-GRID-Filtrationseinheit wird dann auf einen Verteiler gesetzt, der mit einer Vakuumquelle angeschlossen, und eine sterile Filtermembran wird eine sterile Filtermembran in die ISO-GRID-Filtrationseinheit eingesetzt (NEOGRID enthält bereits eine sterile Filtermembran).
d. Mit Hilfe der Vakuumquelle wird ein Teil der verdünnten Probe durch die Filtermembran filtriert
e. Die Membran wird dann auf eine Agarplatte übertragen, die mit einem Medium präpariert ist, das das Wachstum des Zielorganismus zu fördern/differenzieren
Nach der Bebrütung werden die Quadrate auf der Platte, die vermutlich positive Kolonien enthalten, gezählt, um eine wahrscheinlichste Anzahl (MPN) nach folgender Formel zu ermitteln
Formel. MPN= N X log c [(N/N-X)] Wobei N = Gesamtzahl der Gitterquadrate auf dem Filter; und X =Anzahl der positiven Gitterquadrate.